Родился в Пенсильвании, неподалеку от Гаррисберге. Был одним из первых членов Актёрской студии. На киноэкранах дебютировал в 1951 году в драме Ласло Бенедека «Погибель коммивояжёра». Его предстоящая карьера была тесноватым образом связана с телевидением, где Кифер исполнил более сотки ролей в почти всех телефильмах и сериалах, посреди которых «Дымок из ствола», «Альфред Хичкок представляет», «Сумеречная зона», «Моя супруга меня приворожила», «Зелёные просторы», «Звёздный путь» и «Скорая помощь». На большенном экране он появился в таких картинах как «Российские идут! Российские идут!» (1966), «Бутч Кэссиди и Санденс Кид» (1969), «Встреча 2-ух сердец» (1973), «Спящий» (1973) и «Лгун, лгун» (1997).

В 1950 году Кифер женился на актрисе Кэтрин Маклауд, которая родила от него троих отпрыской. Их брак продлился до её погибели в 1997 году. Дон Кифер погиб в сентябре 2014 года в Калифорнии в возрасте 98 лет.